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  • 1. (2024·揭阳模拟)  病毒X为RNA病毒,有多种亚型,不易研制相应的疫苗。科研 工作者运用基因工程技术发明了一种制备病毒X活疫苗的方法,通过该方法制备的疫苗可以预防4种亚型的病毒X,该过程分为如下4个步骤。回答下列问题:
    1. (1) 步骤I:改造病毒X的部分基因。该步骤可以使病毒X失去在正常宿主细胞内增殖的能力。该过程以病毒X的RNA为模板,通过逆转录获取对应的DNA片段后,再通过PCR技术扩增DNA。

      ①逆转录和PCR两个过程中利用的原料均是

      ②科研 工作者将获取的DNA中的某些基因(不包括表面抗原基因)内个别编码氨基酸的碱基序列替换成编码终止密码子的碱基序列。与改造前相比,改造后的病毒X不能复制产生子代病毒,推测其原因可能是

    2. (2) 步骤Ⅱ:构建重组表达载体。科研 工作者将改造后的基因及4种病毒X表面抗原等其他基因一起构建重组质粒,并保存。构建表达载体时须将改造后的基因及4种病毒X的表面抗原等基因置于启动子和之间,启动子是识别和结合的位点。
    3. (3) 步骤Ⅲ:构建适合改造病毒增殖的转基因宿主细胞。设计合成一种特殊tRNA的基因,其产物的反密码子能与(1)中的终止密码子配对结合,并可携带一个非天然氨基酸Uaa。将该基因与载体连接后导入宿主细胞。筛选和鉴定获得成功表达上述tRNA的转基因宿主细胞,提取宿主细胞的全部RNA,用放射性同位素标记的特殊tRNA的基因与之杂交,结果出现了RNA—RNA杂交带。该检测方法的原理是,结果说明
    4. (4) 步骤Ⅳ:利用转基因宿主细胞制备疫苗。将(2)中的重组质粒导入(3)中的转基因宿主细胞,并在补加的培养基中进行培养,则该宿主细胞能利用上述特殊tRNA翻译出改造后的病毒X基因的完整蛋白,产生大量子代病毒,该子代病毒不经灭活或减毒即可制成疫苗。与其他活疫苗相比,该疫苗无致病性,更安全,且可预防多种由病毒X引起的疾病,原因是
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